该技术涉及将高强度的激光对准标本以诱发荧光激发。问题是,使用这种技术扫描大脑深处可能很困难,因为光在深入时从组织上散射,导致图像模糊。双光子成像也是非常耗时的,需要一次一次地激发各个像素。来自麻省理工学院和哈佛大学的研究人员开发了一种改良版的双光子成像,可以在组织内更深的地方成像,同时比目前的方法更快地进行成像。
该团队认为他们的新成像方法可以让科学家们更快地获得大脑中的血管和单个神经元的高分辨率图像。该团队修改了进入组织的激光束,使他们能够比过去的技术更深入并进行更精细的成像。
麻省理工学院希望开发一种方法,允许一次对大量组织样本进行成像,同时保持逐点扫描所提供的高分辨率,随后他们想出了一种方法来操纵照射到样本上的光线。他们的突破在于使用了一种广域显微镜,将光平面照射到组织上,但光的振幅被修改,使研究人员能够在不同时间打开或关闭每个像素。一些像素被点亮,而附近的像素则保持黑暗,形成一个预先设计好的图案,可以在组织的散射光中检测到。在获得原始图像后,使用研究人员创建的计算机算法对获得的每个像素的结果进行重构。
该技术允许对肌肉和肾脏组织的切片进行约200微米深的成像。它还能够对小鼠的大脑进行约300微米的成像。这是在不使用模式化激发和计算机算法重建图像情况下的两倍深度。该技术还能够在产生影像时比传统双光子显微镜快100至1000倍。
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